液相色譜常(chang)見(jian)故障的斷定(ding)及解(jie)決

可能(neng)的原因及解決方法(一)保留時間變(bian)化(hua)1.柱(zhu)溫(wen)變(bian)化(hua) 柱(zhu)恒(heng)溫(wen)，必要時需(xu)配置恒(heng)溫(wen)箱
2.等度(du)與梯(ti)度(du)間未能充分平衡(heng) 至(zhi)少用10倍柱(zhu)體積(ji)的流動(dong)相平衡(heng)柱(zhu)
3.緩沖(chong)液容量不夠(gou) 用》25mmol/L的緩沖(chong)液
4.柱污染 每天沖(chong)洗柱
5.柱內(nei)條件變化(hua) 穩定進樣條件,調節流動相(xiang)
6.柱快達到壽命 采用保護柱(二(er))保留時間縮短1.流速(su)增加 檢(jian)查泵,重新設定流速(su)
2.樣品(pin)超載 降低樣品(pin)量
3.鍵合相流失 流動相PH值(zhi)保持在3~7.5檢查柱的方向(xiang)
4.流動相組(zu)成變化 防止流動相蒸(zheng)發或沉淀
5.溫度增加 柱恒溫(三)保留(liu)時間延長1.流速(su)下降 管(guan)路泄(xie)漏(lou),更(geng)換泵密封圈,排除泵內氣泡
2.硅(gui)膠柱(zhu)(zhu)上活(huo)性點(dian)變化 用(yong)流動(dong)相改性劑,如加三乙胺,或(huo)采(cai)用(yong)堿至鈍化柱(zhu)(zhu)
3.鍵合相流失 同前(二(er))3
4.流動相(xiang)組成(cheng)變化 同前(二)4
5.溫度降(jiang)低 同前(二)5(四) 出現肩(jian)峰(feng)或分*1.樣(yang)品體積過大(da) 用流動相配樣(yang),總的樣(yang)品體積小于*峰(feng)的15%
2.樣品溶劑過(guo)強 采用較弱(ruo)的樣品溶劑
3.柱塌陷或形成短路通道(dao) 更(geng)換色譜柱,采(cai)用較(jiao)弱腐蝕性(xing)條件
4.柱內(nei)燒(shao)結不(bu)銹鋼(gang)失效(xiao) 更換燒(shao)結不(bu)銹鋼(gang),加(jia)在線過濾器,過濾樣品
5.進(jin)樣器損壞(huai) 更換進(jin)樣器轉子(五)鬼(gui)峰1.進(jin)樣閥(fa)殘余峰 每次用后用強溶劑清洗閥(fa),改進(jin)閥(fa)和樣品(pin)的清洗
2.樣品中未知(zhi)物 處理樣品
3.柱(zhu)未平(ping)衡 重新(xin)平(ping)衡柱(zhu),用(yong)流動相作樣品溶劑 (尤其是離(li)子對(dui)色譜)
4.三(TFA)氧化(hua)(hua)(肽譜) 每(mei)天新(xin)配,用(yong)抗氧化(hua)(hua)劑
5.水污染(ran)(反相) 通(tong)過變(bian)化(hua)平衡時間檢查水質量，用HPLC級的水(六) 基(ji)線(xian)噪聲1.氣泡(pao)(尖銳峰) 流動相脫氣,加柱(zhu)后背壓
2.污染(隨機噪聲) 清洗(xi)柱,凈化樣(yang)品(pin),用HPLC級試劑
3.檢測器燈(deng)連續噪聲(sheng) 更(geng)換氘燈(deng)
4.電干(gan)擾(rao)(偶然(ran)噪聲) 采用(yong)穩(wen)壓電源,檢查干(gan)擾(rao)的來(lai)源(如(ru)水浴等(deng))
5.檢測器中(zhong)有氣泡(pao) 流動相脫氣,加(jia)柱后(hou)背壓
(七)峰拖(tuo)尾1.柱超(chao)載(zai) 降(jiang)低樣(yang)品(pin)量,增加柱直徑(jing)采用較高容量的固定相
2.峰(feng)干(gan)擾 清潔樣品(pin),調整流(liu)動相(xiang)
3.硅羥基作用 加三(san)乙胺,用堿致鈍(dun)(dun)化柱(zhu)增加緩(huan)沖液(ye)或鹽的濃(nong)度降低流(liu)動相PH值(zhi),鈍(dun)(dun)化樣(yang)品(pin)
4.同前(四(si))4 同前(四(si))4
5.同前(四(si))3 5.同前(四(si))3
6.死體(ti)(ti)積或柱外體(ti)(ti)積過(guo)(guo)大(da)(da) 連接(jie)點降至(zhi)zui低,對所有連接(jie)點作合適(shi)調整(zheng),盡可能采用(yong)細內徑的連接(jie)管(八(ba))峰展寬1.進樣體(ti)(ti)積過(guo)(guo)大(da)(da) 同(tong)(四(si))1
2.在(zai)進樣閥中造成峰擴(kuo)(kuo)展 進樣前后(hou)排出(chu)氣泡以降低擴(kuo)(kuo)散(san)
3.數據系統采樣速(su)率太慢 設定速(su)率應是每(mei)峰大于10點(dian)
4.檢測器時(shi)間常數(shu)過大 設(she)定時(shi)間常數(shu)為(wei)感興(xing)趣*峰半寬的10%
5.流動(dong)相粘(zhan)度過(guo)高 增加柱溫(wen),采用低粘(zhan)度流動(dong)相
6.檢測池體積過大 用小(xiao)體積池,卸下(xia)熱(re)交(jiao)換(huan)器
7.保(bao)留時間過長(chang) 等度洗脫(tuo)時增加溶劑(ji)含量也可用梯度洗脫(tuo)
8.柱(zhu)外體積過(guo)大 將(jiang)連接(jie)管徑和連接(jie)管長度降至(zhi)zui小
9.樣(yang)品(pin)過(guo)載 進(jin)小濃度小體積樣(yang)品(pin)親(qin)，滿意嗎？

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